小鼠卵巢癌標志物CA125酶聯免疫分析

發布時間： 2016/5/3　　點擊次數： 821次

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小鼠卵巢癌標志物CA125酶聯免疫分析
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中卵巢癌標志物 CA125含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠卵巢癌標志物 CA125 水平。用純化的小鼠
卵巢癌標志物 CA125 抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入卵巢
癌標志物 CA125，再與 HRP標記的卵巢癌標志物 CA125抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗
體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色，并在
酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的卵巢癌標志物 CA125 呈正相關。用
酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠卵巢癌標志物
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
小鼠卵巢癌標志物CA125酶聯免疫分析操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋.

顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉）。
11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止
液后 15分鐘以內進行。
操作程序總結：
計算
以標準物的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的
OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

小鼠卵巢癌標志物CA125酶聯免疫分析注意事項
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本 OD值
大于標準品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月

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